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杏仁过敏原ELISA检测试剂盒96 Tests

发表时间:2014-07-23

  杏仁过敏原 ELISA 试剂盒 96 Tests  - 上海甄准

杏仁中含有 25% 蛋白,其中一些蛋白是过敏原。除了抑制蛋白是已知对花粉交叉反应性,杏仁主要蛋白 AMP 具有最大的关联性。   AMP 具有高耐热性,在不同的生产工艺中,比较稳定。出于这个原因,杏仁是一个重要的食物过敏原。对杏仁过敏的人在食物中隐藏杏仁过敏是一个严重的问题。已经非常低量的杏仁可引起过敏反应,在严重的情况下可能会导致过敏性休克。因此,杏仁过敏的人必须严格避免杏仁或含有杏仁的食物的消耗。

交叉污染 , 主要是存在生产过程。巧克力的生产过程是一个代表性的例子。这就是为什么在许多情况下 , 杏仁食品中残留物的存在不能被排除在外。残留杏仁灵敏度检测在食品行业是必需的。

检测样品:

上海甄准生物提供杏仁过敏原 ELISA 试剂盒具有高灵敏度,特别适合定量检测饼干 , 麦片 , 冰淇淋和巧克力中残留杏仁。

产品特点:

灵敏度(杏仁): 0.2ppm

回收率:  69 - 107%

培育时间: 60min

订购信息:

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规格

ZZKALM - E01

杏仁过敏原 ELISA  试剂盒

Almond Allergens ELISA Kit

96 Tests

检测原理:

上海甄准生物提供的杏仁过敏原检测试剂盒是酶联免疫检测方法。检测杏仁蛋白的抗体包被在微孔板的表面。杏仁含有样品或标准品加到微孔板的孔中。在室温下培育 20 分钟后,稀溶液洗涤将微孔板除去未结合的物质。将过氧化物酶偶联的第二抗体加入孔中,培育 20 分钟后,再次清洗微孔板。加入底物溶液并培育 20 分钟,直到变蓝色。加入终止液抑制显色反应,颜色变为黄色。在 450nm 处检测黄色吸光度。杏仁的浓度与测试样品的颜色强度直接成比例。

盒子包含试剂:

  试剂盒使用 96 次。储存在 2-8°C

1 12 *8 微孔板,包被抗杏仁过敏原的抗体。

2 、杏仁标准品 (0; 0.4; 1; 4; 10 ppm of  杏仁 ) 5 vials  ,每瓶 1.0ml ,红色,即用型。

3 、抗杏仁过氧物酶共轭物: 15ml ,红色,即用型。

4 、底物溶液 (TMB) 15ml ,即用型。

5 、终止液 (0.5 M H2SO4): 15 mL ,即用型。

6 、样品提取和稀释缓冲液 (Tris): 2 x 120 mL 10x 浓缩液,红色。稀释 1+9 蒸馏水。稀释液保存在 4°C ,至少可保存 1 周。如果冷藏结晶过程中沉淀,浓缩物应加热至 37 15 分钟。

7 、洗涤液 (PBS + Tween 20): 60 mL 10x 浓缩液。稀释 1+9 蒸馏水。稀释液保存在 4°C ,至少可保存 1 周。如果冷藏结晶过程中沉淀,浓缩物应加热至 37 15 分钟。

8 、塑料袋储存未使用微孔板。

9 、操作手册。

示例标准值:

下表是示例的典型的标准曲线。计算值是 10ppm 标准品的吸光度。这些值仅是示例。

杏仁  (ppm) 

% binding of 10 ppm

10

100

4

54

1

21

0.4

13

0

6


性能参数:

1 、灵敏度

检测限  (LOD) 0.2 ppm.

最低定量限  (LOQ)  0.4 ppm.

由于样品基质多样性和空白影响,结果低于 LOD LOQ ,认为阴性的

2 、精确度

内部分析精确度    

  3 - 9%

  交互分析精确度    

  3 – 13%

  批间精确度    

  2 - 8%

3 、线性度

样品稀释线性度 85% - 98%

参考文献:

1. Roux KH, et al. (2001) – Detection and stability of the major almond allergen in foods. J Agric Food Chem, 49(5):2131-6

2. Venkatachalam M, et al. (2002) – Effects of roasting, blanching, autoclaving and microwave heating on antigenicity of almond (Prunus dulcis L.) proteins. J Agric Food Chem, 50(12):3544-8

3. Ben Rejeb S, et al. (2005) – Multi-allergen screening immunoassay for the detection of protein markers of peanut and four tree nuts in chocolate. Food Addit Contam, 22(8):709-15

4. Acosta MR, et al. (1999) – Production and characterization of rabbit polyclonal antibodies to almond (Prunus dulcis L.) major storage protein. J Agric Food Chem, 47(10):4053-9

5. Tawde P, et al. (2006) – Cloning and charcterization of profilin (Pru du 4 ), a cross-reactive almond (Prunus dulcis) allergen. J Allergy Clin Immun, 118(4):915-922

6. De Leon MP, et al. (2003) – Immunological analysis of allergenic cross-reactivity between peanut and tree nuts. Clin Exp Allergy, 33(9):1273-80

7. Shridar K, et al. (2001) – Electrophoretic and immunological analyses of almond (Prunus dulcis L.) genotypes and hybrids. J Agric Food Chem, 49(4):2043-52

8. Shridar K, et al. (2002) – Biochemical characterization of amandin, the major storage protein in almond (Prunus dulcis L.). J Agric Food Chem, 50(15):4333-41

9. Gaur V, et al. (2008) – Purification, identification and preliminary crystallographic studies of pru du amandin, an allergenic protein from Prunus dulcis. Acta Cryst Sect Struct Biol Cryst Com, 64(1):32-5

10. Lee SH, et al. (2005) – A 50 kDa maize gamma-zein has marked cross reactivity with the almond major protein. J Agric Food Chem, 53(20):7965-70

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