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牛奶过敏原ELISA检测试剂盒96 Tests

发表时间:2014-07-23

  牛奶过敏原 ELISA 试剂盒 96 Tests  - 上海甄准

牛奶属于最重要的致敏食物成分,尤其是儿童。非常低量牛乳可引起过敏性反应,严重会导致过敏性休克。因此,牛奶过敏的人必须严格避免牛奶或含奶食品。特别是隐藏的牛奶蛋白质的食品,如香肠,饼干,方便食品或饮料对牛奶过敏的人而言是一个关键问题。根据欧盟指令 2003/89/EG 加牛奶的食品必须贴上标签。对于食品中牛奶的检测是必需的。

牛奶中约 80 %的牛奶蛋白质是酪蛋白。β - 乳球蛋白是乳清中主要过敏原,占总蛋白质的 10 %。

检测样品:

上海甄准生物提供牛奶 ELISA 试剂盒根据 NIST1549 ,用于牛奶蛋白质高灵敏度的检测系统。该试剂盒同样能够定量检测和验证食品中的残留酪蛋白和β - 乳球蛋白,如饼干,面包屑,香肠,橙汁,红酒,豆制品和巧克力。

产品特点:

灵敏度(牛奶蛋白): 0.05ppm

回收率: 79-122%

培育时间: 60min

订购信息:

货号

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规格

ZZKMIL-E01

牛奶过敏原 ELISA 试剂盒

Milk Allergens ELISA Kit

96 Tests

检测原理:

上海甄准生物提供的牛奶过敏原检测试剂盒是酶联免疫检测方法。混合抗体包被在微孔板的表面。牛奶蛋白含有样品或标准品加到微孔板的孔中。在室温下培养 20 分钟后,稀溶液洗涤将微孔板除去未结合的物质。将过氧化物酶偶联的第二混合抗体加入孔中,培育 20 分钟后,再次清洗微孔板。加入底物溶液并培育 20 分钟,直到变蓝色。加入终止液抑制显色反应,颜色变为黄色。在 450nm 处检测黄色吸光度。牛奶蛋白的浓度与测试样品的颜色强度直接成比例。

盒子包含试剂:

  试剂盒使用 96 次。储存在 2-8°C

1 12 *8 微孔板,包被牛奶蛋白的抗体。

2 、牛奶蛋白标准品 (0, 0.4, 1, 4, 10 ppm)  根据 NIST RM 1549 5 vials  ,每瓶 1.0m 100x 浓缩液,蓝色。稀释 20ul 标准品到 19820ul 预稀释的提取液和样品稀释缓冲液得到上述浓度。保存在 4°C ,稀释标准品溶液可以保存至少 24h

3 、抗牛奶蛋白过氧物酶共轭物: 15ml, 红色,即用型。

4 、底物溶液 (TMB) 15ml 即用型。

5 、终止液 (0.5 M H2SO4): 15 mL 即用型。

6 、样品提取和稀释缓冲液 ( 碳酸盐 ): 2 x 120 mL 10x 浓缩液,红色。稀释 1+4 蒸馏水。稀释液保存在 4°C ,至少可保存 1 周。如果冷藏结晶过程中沉淀,浓缩物应加热至 37 15 分钟。

7 、洗涤液 (PBS + Tween 20): 60 mL 10x 浓缩液。稀释 1+9 蒸馏水。稀释液保存在 4°C ,至少可保存 1 周。如果冷藏结晶过程中沉淀,浓缩物应加热至 37 15 分钟。

9 、塑料袋储存未使用微孔板。

10 、操作手册。


示例标准值:

下表是示例的典型的标准曲线。计算值是 10ppm 标准品的吸光度。这些值仅是示例。

牛奶蛋白  (ppm) 

% binding of 1 0ppm

10

100

6

86

1

50

0.4

32

0

9


性能参数:

1 、灵敏度

检测限  (LOD) 0.05ppm.

最低定量限  (LOQ)  0.4ppm

由于样品基质多样性和空白影响,结果低于 LOD LOQ ,认为阴性的

2 、精确度

内部分析精确度    

8-10%

互分析精确度    

10-17 %

3 、线性度

样品稀释线性度 80% - 130%

References

1.   De Luis R, et al. (2007) – Development of two immunoassay formats to detect ß-lactoglobulin. J of Food Protection, 70(7):1691-97

2.   Restani P, et al. (1999) – Cross-reactivity between milk proteins from different animal species. Clin Exp Allergy,29(7):997-1004

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4.   Hefle SL, et al. (2004) – Validated sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for casein and its application to retail milk-allergic complaint foods. J Food Prot, 67(9):1933-38

5.   Patrick W, et al. (2009) – Determination of the bovine food allergen casein in white wines by quantitative indirect ELISA, SDS-Page, Western blot and immunostaining. J Agric Food Chem, 57(18):8399-405

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8.   De Luis R, et al. (2007) – Development of two immunoassay formats to detect ß-lactoglobulin: influence of heat treatment on ß-lactoglobulin immunoreactivity. J Food Prot, 70(7):1691-7

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10.   Levin ME, et al. (2005) – Anaphylaxis in a amilk-allergic child after ingestion of soy formula cross contaminated with cow’s milk protein. Pediatrics, 116(5):1223-5

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